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色譜儀及其分類

更新時(shí)間:2011-07-29      點(diǎn)擊次數(shù):1381
  色譜法也叫層析法,它是一種能的物理分離技術(shù),將它用于分析化學(xué)并配合適當(dāng)?shù)臋z測手段,就成為色譜分析法。
  
  色譜儀,為進(jìn)行色譜分離分析用的裝置。包括進(jìn)樣系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)以及流動(dòng)相控制系統(tǒng)等。現(xiàn)代的色譜儀具有穩(wěn)定性、靈敏性、多用性和自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)。有氣相色譜儀、液相色譜儀和凝膠色譜儀等。這些色譜儀廣泛地用于化學(xué)產(chǎn)品,高分子材料的某種含量的分析,凝膠色譜還可以測定高分子材料的分子量及其分布。
  
  色譜法的zui早應(yīng)用是用于分離植物色素,其方法是這樣的:在一玻璃管中放入碳酸鈣,將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中。此時(shí),玻璃管的上端立即出現(xiàn)幾種顏色的混合譜帶。然后用純石油醚沖洗,隨著石油醚的加入,譜帶不斷地向下移動(dòng),并逐漸分開成幾個(gè)不同顏色的譜帶,繼續(xù)沖洗就可分別接得各種顏色的色素,并可分別進(jìn)行鑒定。色譜法也由此而得名。
  
  現(xiàn)在的色譜法早已不局限于色素的分離,其方法也早已得到了極大的發(fā)展,但其分離的原理仍然是一樣的。我們?nèi)匀唤兴V分析。
  
  氣相色譜儀
  
  氣體工業(yè)名詞術(shù)語。一種對(duì)混合氣體中各組分進(jìn)行分析檢測的儀器。樣品由載氣帶入,通過對(duì)欲檢測混合物中組分有不同保留性能的色譜柱,使各組分分離,依次導(dǎo)入檢測器,以得到各組分的檢測信號(hào)。按照導(dǎo)入檢測器的先后次序,經(jīng)過對(duì)比,可以區(qū)別出是什么組分,根據(jù)峰高度或峰面積可以計(jì)算出各組分含量。通常采用的檢測器有:熱導(dǎo)檢測器,火焰離子化檢測器,氦離子化檢測器,超聲波檢測器,光離子化檢測器,電子捕獲檢測器,火焰光度檢測器,電化學(xué)檢測器,質(zhì)譜檢測器等。
  
  氣相色譜儀的構(gòu)造
  
  氣相色譜儀的基本構(gòu)造有兩部分,即分析單元和顯示單元。前者主要包括起源及控制計(jì)量裝置﹑進(jìn)樣裝置﹑恒溫器和色譜柱。后者主要包括檢定器和自動(dòng)記錄儀。色譜柱(包括固定相)和檢定器是色譜儀的核心部件。
  
  操作1)氣相色譜儀操作要點(diǎn)
  
  1.參照所屬儀器的說明書擺放好儀器,將有關(guān)插頭對(duì)號(hào)入座,接地線要牢固接地。
  
  2.將層析柱接入氣路,檢查氣路是否漏氣,熟悉高壓氣瓶的用法;開總壓閥->調(diào)節(jié)減壓閥(使壓力為2×10Pa)->調(diào)節(jié)穩(wěn)壓閥﹑針形閥,使載氣流速達(dá)到所需要求。
  
  3.加熱層析柱至所需溫度(波動(dòng)值<0.5℃)。加熱進(jìn)樣器,使其溫度稍高于樣品組分的zui高沸點(diǎn)。加熱檢定器,使其溫度與柱溫相同或稍高,切勿低于柱溫,以防樣品蒸氣冷凝污染鑒定器。
  
  4.打開檢定器溫壓開關(guān),開動(dòng)記錄儀放大部件(對(duì)氫火焰離子化檢定器是啟動(dòng)直流放大器)。調(diào)節(jié)檢定器,使基線穩(wěn)定,定好零點(diǎn),即可開始進(jìn)樣分析。
  
  5.樣品為液體時(shí),可直接用微量注射器由進(jìn)樣口注入,若樣品為氣體時(shí),即可用氣體六通閥或直接用注射器進(jìn)樣。
  
  2)氣相色譜儀條件的選擇
  
  在選好色譜柱的前提下,還應(yīng)注意下述各點(diǎn):
  
  1.載氣流速。用氫作載氣時(shí),一般填充柱之載氣流速為5~10厘米/秒的線性速度。適當(dāng)?shù)牧魉伲欣谔岣叻直媛省?br />  
  2.柱溫。通常采用與樣品平均沸點(diǎn)相等或高出10度的柱溫為宜。但是,在氣液色譜中,流動(dòng)相以恒溫進(jìn)入色譜柱時(shí),將使相似化合物早餾出峰互相重疊,晚餾出峰寬度增加。若改為單階
  
  梯式或多階梯式線性程序升溫方式,則可大大提高其分辨率。在選擇初步(化合物中zui低沸點(diǎn))升溫速率(0.5~6℃/分)和zui終溫度(化合物中zui高沸點(diǎn),但不高于固定相的沸點(diǎn))的
  
  基礎(chǔ)上,經(jīng)過試驗(yàn)就可找出與理想分辨率有關(guān)的柱溫。
  
  3.進(jìn)樣的體積與速度。普通填充柱的氣體樣品進(jìn)樣量為0.1~1毫升,液體樣品為0.1~2毫升。進(jìn)樣體積過大,會(huì)使峰形扁平甚至重疊,有時(shí)還會(huì)出現(xiàn)畸形峰,不利于測量面積。此外,氫
  
  火焰離子化檢定器的進(jìn)樣量應(yīng)比熱導(dǎo)池檢定器小。至于進(jìn)樣速度,原則上要求越快越好,這樣可提高分離效果,降低進(jìn)樣誤差。
  
  液相色譜
  
  液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography簡稱HPLC)又稱高速或高壓液相色譜。該方法是吸收了普通液相層析和氣相色譜的優(yōu)點(diǎn),經(jīng)過適當(dāng)改進(jìn)發(fā)展起來的。它既有普通液相層析的功能(可在常溫下分離制備水溶性的物質(zhì)),又有氣相色譜的特點(diǎn)(即高壓,高速,高分辨率和高靈敏度);它不僅適應(yīng)于很多不易揮發(fā),難熱分解物質(zhì)的定性和定量分析,而且也適用于上述物質(zhì)的制備和分離。
  
  液相色譜按其固定相的性質(zhì)可分為凝膠色譜,疏水性液相色譜,反相液相色譜離子交換液相色譜,親和液相色譜以及聚焦液相色譜等類型。用不同類型的液相色譜分離或分析各種化合物的原理基本上與相對(duì)應(yīng)的普通液相層析的原理相似。其不同之處是液相色譜靈敏,快速,分辨率高,重復(fù)性好,且須在色譜儀中進(jìn)行。
  
  離子色譜儀
  
  離子色譜是液相色譜的一種,是分析陰陽離子的一種液相色譜方法,該方法具有選擇性好、靈敏、快速、簡便等優(yōu)點(diǎn),并且可以同時(shí)測定多種組分。
  
  通常情況下,離子色譜可以分為三種類型:離子交換色譜、離子排斥色譜、離子對(duì)色譜。
  
  離子交換色譜
  
  離子交換色譜以離子間作用力不同為原理,主要用于有機(jī)和無機(jī)陰、陽離子的分離。
  
  離子排斥色譜
  
  離子排斥色譜基于Donnan排隊(duì)斥作用,是利用溶質(zhì)和固定相之間的非離子性相互作用進(jìn)行分離的。它主要用于機(jī)弱酸和有機(jī)酸的分離,也可以用于醇類、醛類、氨基酸和糖類的分離。
  
  離子對(duì)色譜
  
  離子對(duì)色譜的分離機(jī)理是吸附、分離的選擇性主要由流動(dòng)相決定。
  
  該方法主要用于表面活性陰離子和陽離子以及金屬絡(luò)合物的分離。
  
  下面我們以離子交換色譜為例簡單介紹一下離子色譜的原理。
  
  一事實(shí)上酸度下,樣品離子和固定相基團(tuán)之間存在著相互作用,對(duì)于不同的樣品離子,這種作用的大小是不同的。因此在隨流動(dòng)相通過色譜柱的過程中,作用力強(qiáng)的樣品離子保留時(shí)間要比作用力弱的離子長,經(jīng)過一段時(shí)間后,就可以實(shí)現(xiàn)樣品的分離。
  
  以陰離子的分離為例說明一下離子色譜的分離過程。
  
  在色譜柱中,填充了無數(shù)的離子交換劑作為離子分離的固定相,固定相上吸附了很多陽離子。
  
  充滿色譜柱的流動(dòng)相為某種鹽的溶液,在沒有樣品進(jìn)入時(shí),流動(dòng)相中的陰離子和固定相的陽離子保持平衡。
  
  樣品中含有兩種待分離陰離子,基中體積較大的A與固定相的正電荷作用力較大,而體積較小的B作用力小。
  
  在樣品進(jìn)入色譜柱后,陰離子A、B與流動(dòng)相陰離子一同前進(jìn),三種離子不斷的交替占據(jù)與固定相陽離子相吸的位置;樣品陰離子A與正電荷的作用力較大因而移動(dòng)較慢,而B移動(dòng)較快,從而實(shí)現(xiàn)了分離。
  
  zui終,因?yàn)榱鲃?dòng)相陰離子的數(shù)量有優(yōu)勢,所以樣品陰離子A、B都分流出色譜柱,對(duì)在不同時(shí)間流出色譜柱,對(duì)在不同時(shí)間流出色譜柱的樣品離子進(jìn)行檢測,就可以知道樣品組分的種類與含量。
  
  離子色譜儀的典型結(jié)構(gòu)由輸液泵、進(jìn)樣閥、色譜柱、抑制柱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。
  
  輸液泵
  
  雙頭往復(fù)泵是非常常用的一種輸液泵,它由電機(jī)帶動(dòng)凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),兩個(gè)柱塞桿往復(fù)運(yùn)動(dòng),吸入排出流動(dòng)相。兩個(gè)柱塞桿的移動(dòng)有一個(gè)時(shí)間差,正好補(bǔ)償流動(dòng)相輸出的脈沖,因而流速相當(dāng)平穩(wěn)。
  
  進(jìn)樣閥
  
  量常用的進(jìn)樣方法是六通閥進(jìn)樣,這種方法進(jìn)樣量的可變范圍大,耐高壓,而且易于自動(dòng)化。
  
  色譜柱
  
  分離系統(tǒng)的主要元件是色譜柱,它是色譜分離過程中存放固定相的場所。離子色譜儀的柱填料是離子色譜儀研究的熱點(diǎn),是離子色譜儀發(fā)展的主要推動(dòng)力,發(fā)展很快。
  
  離子栓測器分為兩大類,即電化學(xué)檢測器和光學(xué)栓測器,電化學(xué)檢測器包括電導(dǎo)、直流安培、脈沖安培和積分安培等,而光學(xué)檢測器包括紫外、或見光和熒光檢測器。
  
  其中電導(dǎo)檢測器是離子色譜zui重要的檢測器,現(xiàn)簡單介紹如下。
  
  所有的離子化合物(有機(jī)離子、無機(jī)離子、強(qiáng)酸和強(qiáng)堿)以及可被解離的化合物(弱酸和弱堿)的水溶液都能夠?qū)щ姟k妼?dǎo)檢測器就是以離子色譜流動(dòng)相中導(dǎo)電的變化作為定量的依據(jù)的。
  
  電導(dǎo)檢測器的結(jié)構(gòu)比較簡單、檢測池在兩個(gè)電極中間,當(dāng)在電極上加上電壓時(shí),栓測池內(nèi)溶液中的離子就會(huì)產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)。通過對(duì)運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的電流的測量就可以知道溶液中離子的濃度。
  
  而如果流動(dòng)相的導(dǎo)電性很高,而樣品的導(dǎo)電性較低,那么電導(dǎo)檢測器就不會(huì)有效的檢測出樣品離子的濃度。
  
  因此,人們?cè)谏V柱和電導(dǎo)檢測器之間加上了一個(gè)抑制柱,它可以改變流動(dòng)相和樣品的導(dǎo)電性,從而使樣品離子得到靈敏的檢測。
  
  就用和發(fā)展
  
  經(jīng)過多年的發(fā)展,離子色譜已經(jīng)在生產(chǎn)生活的各種領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。
  
  環(huán)境分析
  
  離子色譜在其產(chǎn)生初期zui重要的應(yīng)用便是環(huán)境樣品的分析,其應(yīng)用對(duì)象主要是環(huán)境樣品中各種陰、陽離子的定性、定量分析。
  
  作為一種快速準(zhǔn)確而有效果分析方法,離子色譜廣泛應(yīng)用于微電子、電力工業(yè)中高純水、高純?cè)噭┖哿侩s質(zhì)的分析。
  
  食品飲料分析
  
  與傳統(tǒng)的分析方法相比,離子色譜法的突出優(yōu)點(diǎn)是多組分同時(shí)進(jìn)行分析,樣品處理簡單,因此成為食品和飲料中陰陽離子、有機(jī)酸、胺和糖類分析的較好方法。
  
  聯(lián)用技術(shù)
  
  離子色譜聯(lián)用技術(shù)是離子色譜發(fā)展的一個(gè)方向。聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展,使得離子色譜分析技術(shù)的應(yīng)用范圍和檢測靈敏度有了很大的提高,關(guān)于離子色譜--原子吸收(發(fā)射)光譜、離子色譜--電感耦合等離子體、離子色--質(zhì)譜的聯(lián)用已有不少報(bào)道。
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